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找到 关键词 包含"表型" 31条结果
  • 哮喘的临床与炎症表型

    支气管哮喘( 简称哮喘) 作为一种异质性疾病, 其发病机制复杂多样, 病理生理改变和临床表现同样具有多样性。表型( Phenotypes) 是指生物体的可观察特征, 是基因型和环境因素相互作用的结果[ 1] ; 它也是能将生物体分成不同独立类群的一系列特征[ 2] 。近年来, 学者们对哮喘的表现和治疗反应的异质性认识不断增加, 从哮喘的不同角度进行观察并归纳出多种临床和炎症表型。虽然对这些表型尚未达成共识, 但它有助于深入认识哮喘的发病机制, 有助于获得对哮喘进行更有针对性的治疗策略。 目前现有的哮喘的分类主要依据是疾病病因、疾病的控制水平与严重程度[ 3] 。这些分类往往不能很好的反映哮喘的异质性。2009 版的哮喘防治指南( GINA) 首次将“表型”的定义引入, 并提出基于表型的分类有助于指导治疗及判断预后[ 3] 。虽然指南并没有明确作出哮喘表型的分类, 但这足以显示出学界对哮喘表型分类的关注。目前, 对哮喘的表型分类仍无统一的共识, 以不同的方法和分类原则可有不同的分类。

    发表时间:2016-08-30 11:53 导出 下载 收藏 扫码
  • 慢性阻塞性肺疾病患者体重指数、呼出气一氧化氮、肺气肿评分分组特征

    目的 慢性阻塞性肺疾病( COPD) 是一种异质性很强的疾病。由于存在相同的生物学或生理学机制, 理论上可以将具有相同临床表现、治疗反应及预后的患者归类即可称为一类表型。目前对各种临床表型的研究尚不够深入, 使COPD 的诊断、评估及治疗面临困境。将根据COPD 患者的体重指数( BMI) 、肺气肿评分( Goddard 评分) 、呼出气一氧化氮( FeNO) 值进行特征研究, 以提高对 COPD 的认识。方法 选取2011 年5 月至2012 年2 月在上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸科就诊的稳定期COPD 患者, 进行相关临床数据的采集, 包括肺功能检查、病史询问、COPD 评估测验 ( CAT) 、圣·乔治呼吸问题调查( SGRQ) 、医院焦虑抑郁评分( HAD) 、FeNO、6 分钟步行距离试验等。根据BMI、Goddard 评分、FeNO值分类进行特征研究。结果 符合入选条件的稳定期COPD 患者共 126 例。BMI 1 级患者生活质量较差, HAD 较高, FEV1 较低, 弥散功能较差, 肺气肿评分较高。BMI 4 级患者静息氧饱和度较低。不能通过FeNO 将患者进行表型分类。肺气肿型患者BMI 较低, 弥散功能下降, 生活质量更差。结论 可以通过BMI 及Goddard 评分区分出一组具有相同特征的COPD 型, 即低BMI 型及肺气肿型, 但不能通过FeNO 来分型。

    发表时间:2016-09-13 03:51 导出 下载 收藏 扫码
  • 主动脉瓣膜间质细胞体外诱导钙化的实验研究

    摘要: 目的 体外培养、诱导主动脉瓣膜间质细胞钙化,并观察其表型变化。 方法 使用胶原酶消化法从新鲜猪主动脉瓣膜上分离并体外原代培养主动脉瓣膜间质细胞,行免疫荧光染色细胞鉴定。取4~8代间质细胞,随机分为两组,实验组:以含甘油磷酸、维生素C、地塞米松的钙化培养基进行钙化诱导培养2周;对照组:以标准培养基培养2周。在光学显微镜下行钙化结节计数,茜素红染色观察并半定量检测钙沉积含量;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测间质细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及钙化相关因子(骨钙素、 骨桥蛋白、核心结合因子)的基因表达。 结果 从猪主动脉瓣膜上成功分离并体外培养瓣膜间质细胞,α-SMA及波形蛋白(vimentin)染色阳性,血管性血友病因子(vWF)染色阴性。间质细胞钙化诱导培育2周可成功诱导钙化,自发形成钙化结节,实验组钙化结节(156.25±17.38个/孔vs. 2.50±1.29个/孔)和钙沉积 (17.52±2.04 vs. 1.00±0.22) 显著高于对照组(Plt;0.05); 实时RT-PCR提示:实验组αSMA、骨钙素、骨桥蛋白、核心结合因子等表达均较对照组明显升高(Plt;0.05)。 结论 体外诱导钙化的瓣膜间质细胞呈现相对激活状态,表型向收缩表型和成骨表型转化,可能为瓣膜钙化的病理基础。

    发表时间:2016-08-30 06:02 导出 下载 收藏 扫码
  • 白藜芦醇恢复去分化正常髓核细胞表型的实验研究

    目的研究体外单层培养与藻酸盐微球立体培养对人正常髓核细胞分化的影响,并探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)恢复藻酸盐微球立体培养下去分化髓核细胞表型的调节机制。 方法取6例腰椎爆裂骨折患者自愿捐赠的正常髓核组织分离培养髓核细胞,并行细胞鉴定;取单层培养的第1、3、5、7代髓核细胞分别行形态学观察、β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-gal)染色观察细胞衰老情况及甲苯胺蓝染色观察蛋白多糖表达。分别取单层培养和藻酸盐微球立体培养的第1代髓核细胞检测细胞增殖情况。取立体培养1周的第7代髓核细胞随机分为立体培养空白组(A组)、RES组(B组)、沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1(silent mating type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)-小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)+ RES组(C组)、阴性对照-siRNA+RES组(D组),另设置髓核细胞单层培养空白组(E组),行相应培养后采用Western blot检测SIRT1、聚蛋白多糖(Aggrecan)和Ⅱ型胶原蛋白表达,实时荧光定量PCR检测SIRT1 mRNA表达水平。 结果细胞鉴定提示培养细胞为髓核细胞。形态学观察及SA-β-gal、甲苯胺蓝染色示,在体外连续单层培养条件下,正常髓核细胞易发生去分化,且随着传代次数增加趋势愈明显。藻酸盐微球立体培养48 h内髓核细胞增殖显著低于单层培养(P lt; 0.05),但能显著提高去分化髓核细胞SIRT1、Ⅱ型胶原与Aggrecan蛋白的表达,E组与A组比较差异有统计学意义(P lt; 0.05);与A组相比,B组3种蛋白表达显著提高(P lt; 0.05)。C组SIRT1 mRNA和蛋白表达均受明显抑制,显著低于B、D组(P lt; 0.05),Ⅱ型胶原与Aggrecan蛋白表达也显著低于B、D组(P lt; 0.05)。 结论连续体外单层培养条件下,髓核细胞增殖速度较快,但在培养过程中易发生去分化现象;而在藻酸盐微球立体培养条件下,RES可以恢复去分化髓核细胞表型,合成更多细胞外基质,这一机制与SIRT1的调节有关。

    发表时间:2016-08-31 04:07 导出 下载 收藏 扫码
  • 细胞老化及老化表型改变在椎间盘退行性变中的研究进展

    目的综述细胞老化及老化表型改变在椎间盘退行性变中的研究进展。 方法查阅椎间盘退行性变领域细胞老化相关的国内外文献并回顾分析,综述椎间盘细胞的老化现象、老化表型改变、老化信号激活与椎间盘退行性变的相互关系,评价抗老化治疗对椎间盘退行性变的修复作用。 结果随着机体衰老与椎间盘退行性变,椎间盘细胞通过选择性地激活p53-p21-视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)或p16INK4A-RB信号通路而老化。老化细胞的聚集不仅弱化了椎间盘的自我修复能力,同时上调表达炎性因子、基质降解酶等老化分泌表型,从而进一步恶化邻近细胞赖以生存的微环境。寻找老化细胞特异性的生化标记物是进一步探明椎间盘细胞老化分泌表型的关键,安全且高效的抗老化治疗依赖于对椎间盘细胞老化机制的深入认识。 结论从细胞老化及老化表型改变角度认识椎间盘细胞活性丢失与功能改变的病理机制,为理解椎间盘退变性变的细胞学病因提供了新思路。

    发表时间:2016-08-31 04:22 导出 下载 收藏 扫码
  • BMP-2 联合低氧环境诱导BMSCs 向软骨表型分化的研究

    目的 探讨BMP-2 联合低氧环境诱导BMSCs 向软骨表型分化的可行性,并进一步研究其生物学机制。 方法 取4 周龄健康清洁级雌性SD 大鼠骨髓采用贴壁法体外培养BMSCs,取第2 代细胞根据培养条件不同分为4 组:常氧对照组(A 组)、常氧加BMP-2 诱导液组(B 组)、低氧(O2 浓度3%)对照组(C 组)和低氧加BMP-2诱导液组(D 组)。倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,培养7、14、21 d 阿利新蓝染色检测各组软骨 基质糖胺聚糖(glycosaminoglycans,GAG)分泌水平,21 d 时Western blot 检测细胞内Ⅱ型胶原和低氧诱导因子1α(hypoxiainducible factor 1α,HIF-1α)蛋白表达水平,RT-PCR检测成软骨、成骨以及低氧相关基因表达水平。 结果 诱导培养21 d,D 组细胞变为类圆形,细胞密度降低,细胞周边呈陷窝样,基质包裹细胞;A、B、C 组均未见上述典型变化。D 组阿利新蓝染色明显较其他组深,并随诱导时间延长蓝染加深,21 d 时出现成片深染蓝色,其他组各时间点仅见散在少量的淡染蓝色。Western blot 检测D 组细胞内Ⅱ型胶原蛋白表达水平较其他组显著增高,C、D 组HIF-1α 蛋白表达水平较A、B 组显著增高,差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。RT-PCR 检测D 组成软骨分化相关指标Ⅱ型胶原α1(collagen Ⅱ α1,COL2 α1)、聚集蛋白聚糖表达最高,而B 组成骨分化相关指标COL1 α1、ALP、Runt 相关转录因子2 表达水平最高,C、D 组低氧相关指标HIF-1α 较A、B 组显著增强,差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。 结论 BMP-2 联合低氧(O2 浓度3%)环境可以诱导大鼠BMSCs 向软骨分化,并抑制其成骨分化,HIF-1α 可能是参与促软骨生成过程中的一个重要信号分子。

    发表时间:2016-08-31 04:23 导出 下载 收藏 扫码
  • 髓核细胞表型标记的研究进展

    目的 综述髓核细胞表型标记的研究进展。 方法 广泛查阅近年关于髓核细胞表型标记的文献,并对其进行分析。 结果 由于不同的生物力学特性,髓核细胞和关节软骨细胞的形态及细胞外基质组分如蛋白多糖与Ⅱ型胶原α1 的比率存在差异;通过髓核细胞的表面标记(CD24)、基因标记(低氧诱导因子1α、葡萄糖转运蛋白1、基质金属蛋白酶、VEGF-A 等)及细胞内各种分子标记(角蛋白19 和磷脂酰肌醇聚糖3、配对盒1、叉头蛋白和整联蛋白涎蛋白等)可以初步鉴别髓核细胞。 结论 髓核细胞与关节软骨细胞表型标记存在差异,但仍缺乏特异性标记物。

    发表时间:2016-08-31 05:44 导出 下载 收藏 扫码
  • 大鼠软骨细胞复制性老化的体外观察

    目的 对体外培养大鼠软骨细胞复制性老化行为进行观察,为进一步研究组织工程软骨退变机制,以及用药物干预并逆转其退变提供实验参考。方法 4周龄SD大鼠,体重185~200 g,断颈处死,分离培养软骨细胞,采用组织化学法检测传代培养的P1、P2、P3及P4代软骨细胞老化相关β-半乳糖苷酶,透射电镜观察细胞结构,免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达,阿力新蓝染色检测胞外基质硫酸糖胺多糖 (sulfat-glycosaminoglycan,GAG)含量和分子结构,RT-PCR方法检测软骨细胞Ⅱ型胶原表达,流式细胞仪分析细胞周期及增殖指数(proliferative index,PI)。结果 β-半乳糖苷酶检测:P1、P2代软骨细胞偶见阳性染色;P3代可见少数细胞阳性染色,与P1、P2代比较差异有统计学意义(P<0.01);P4代与P1~P3代比较,阳性染色显著增加,差异有统计学意义(P<0.01) 。透射电静镜观察:P1、P2代细胞胞浆内细胞器较多,胞核及核仁清晰,无凋亡软骨细胞;P3代细胞核浆比较大,胞浆内细胞器减少,胶原网络结构模糊不清;P4代细胞核浆比例增大,核固缩。P4代细胞G0/G1期含量增加(83.8%),而P1、P2及P3代分别为79.1%,79.2%,80.8%。P4代细胞PI为16.2%,P1、P2、P3代PI分别为20.9%、20.8%、19.2%。PCNA表达、GAG含量、长链分子百分比、Ⅱ型胶原表达减少等指标P4代与前代比较差异均有统计学意义(Plt;0.01)。结论 体外培养的大鼠软骨细胞P4代出现老化。

    发表时间:2016-09-01 09:20 导出 下载 收藏 扫码
  • 鹿茸多肽对软骨表型化骨髓间充质干细胞凋亡的影响

    目的 通过观察鹿茸多肽对白细胞介素 1β(interleukin 1β,IL-1β)诱导软骨表型化骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)凋亡的影响,以优化软骨组织工程的种子细胞。方法 新西兰大白兔2只,抽取其骨髓;经密度梯度离心得到单核细胞,经体外分离、培养获得兔MSCs。用转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)将其诱导分化软骨表型。将软骨表型化MSCs随机分成A组(空白对照组):5%胎牛血清的αMEM培养液;B组(IL-1β组):5%胎牛血清的αMEM培养液加入100 ng IL-1β;C组(鹿茸多肽组):5%胎牛血清的αMEM培养液加入10 μg/ml鹿茸多肽作用3d后再加入100 ng IL-1β;D组(TGF-β1组):5%胎牛血清的α-MEM培养液加10 ng/ml TGF-β1作用3 d后再加入100 ng IL-1β。分别于培养24、48和72 h后取样,采用透射电镜观察细胞形态,Annexin V法检测细胞凋亡率,RT-PCR技术分析Caspase-3 mRNA表达水平,ELISA法检测Caspase-3蛋白酶活性。结果 透射电镜观察:B组24 h后细胞核内染色质开始呈块状凝集,分布于核膜下,核膜不规则;48 h后细胞核内染色质凝集加剧;72 h后部分细胞内的核碎片凝集成凋亡小体。各时间点C、D组细胞结构改变相对滞后,且数量较少;A组细胞结构几乎无明显改变。各时间点B组MSCs凋亡率、Caspase-3 mRNA表达及蛋白酶活性逐渐增高,与A组比较差异有统计学意义(Plt;0.01);C、D组与B组比较则逐渐下降,且差异有统计学意义(Plt;0.05)。结论 Caspase3参与MSCs凋亡,鹿茸多肽通过减少Caspase-3 mRNA表达,并抑制其蛋白酶活性,阻止或逆转软骨表型化MSCs凋亡。

    发表时间:2016-09-01 09:25 导出 下载 收藏 扫码
  • 软骨细胞形态、表型与胞间通讯研究

    目的 探讨体外培养下新生兔软骨细胞的缝隙连接与软骨细胞形态、表型的关系。方法 向96孔板内的第5代新生兔膝关节软骨细胞培养基内加入荧光染料CFDA- AM,激光共聚焦显微镜测量不同形态的单个软骨细胞内的荧光强度;以激光淬灭软骨细胞内的荧光后定时测量荧光恢复曲线。将因股骨颈骨折行人工关节置换的人股骨头关节软骨切成20μm薄片;同样加入荧光染料后测定激光淬灭前后荧光强度。结果 各种形态的扁平状软骨细胞摄入CFDA-AM后平均荧光强度差异很大平均83(1~ 274),平均值明显低于单个球形软骨细胞者平均2057(340~3538);只有集落中央的球形软骨细胞才有逐渐的荧光恢复;但关节软骨陷窝内软骨细胞内的荧光经激光淬灭后可以恢复。结论 软骨细胞的形态影响其荧光染料的摄入量;缝隙连接只出现在球形软骨细胞之间,与软骨细胞的特有表型同时出现;股骨头人关节软骨陷窝内的软骨细胞间有缝隙连接存在,可以进行活体组织原位缝隙连接研究。

    发表时间:2016-09-01 10:14 导出 下载 收藏 扫码
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