杨丽莎 , 李福祥
  • 西南医科大学附属医院呼吸内科(四川泸州 646000);
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目的 探究小干扰 RNA(siRNA)沉默非小细胞肺癌 A549 细胞系 E-钙黏蛋白(E-cadherin)基因(CDH1)后对于 A549 细胞转移和侵袭的促进作用。方法 采用 siRNA 技术沉默 A549 细胞中的 CDH1 基因,采用 RT-QPCR 和 Western blot 法检测沉默后的基因表达与蛋白表达。将细胞分为对照组(Control)、siRNA 阴性组(siRNA-NC)和 siRNA 基因沉默组(siRNA-CDH1),CCK-8 检测基因沉默后 12、24、48、72 h 细胞活力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化,Transwell 小室检测细胞侵袭能力的变化,Western blot 法检测细胞转移侵袭关键因子波形蛋白(vimentin),基质金属蛋白 MMP-2 和 MMP-9,以及 N-cadherin的表达水平。RT-QPCR 检测 vimentin、MMP-2、MMP-9 以及 Slug、Snail 的 mRNA 表达水平。结果 CDH1 沉默后,A549 细胞活力显著增高,且呈时间依赖性,相比 Control 组和 siRNA-NC 组差异有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕实验和 Transwell 小室实验结果显示,CDH1 沉默后细胞迁移和侵袭能力显著增强,相比 Control 组和 siRNA-NC 组差异有统计学意义(P<0.05)。siRNA-CDH1组 中 vimentin、MMP-9、MMP-2 以及 N-cadherin 的表达显著上调,vimentin、MMP-9、MMP-2 以及 Slug、Snail 的 mRNA 表达水平也上调,相比 Control 组和 siRNA-NC 组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CDH1 缺失可以增加 A549 细胞的增殖能力以及侵袭能力。

引用本文: 杨丽莎, 李福祥. 沉默 CDH1 基因促进非小细胞肺癌 A549 细胞系转移侵袭的机制. 中国呼吸与危重监护杂志, 2019, 18(5): 452-456. doi: 10.7507/1671-6205.201807042 复制

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