• 1. 上海交通大学医学院附属第三人民医院普外一科(上海 201900);
  • 2. 安徽省蚌埠医学院研究生部(安徽蚌埠 233030);
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目的 研究胆囊癌CD133阳性细胞侵袭能力的产生机制。 方法 Transwell法检测CD133阳性细胞和CD133阴性细胞的迁移和侵袭能力。半定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法、蛋白免疫印迹法、细胞免疫荧光法分别检测CD133阳性细胞和CD133阴性细胞中CXCR4的表达。分别用SDF-1α、AMD3100作用GBC-SD细胞后,Transwell法检测CD133阳性细胞和CD133阴性细胞的迁移和侵袭能力。半定量RT-PCR法检测GBC-SD细胞中CD133 mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测GBC-SD细胞中CD133蛋白表达。 结果 ①CD133阳性细胞中穿膜细胞数明显多于CD133阴性细胞(23.78±8.74比6.56±3.09,P=0.000 7)。②CD133阳性细胞中CXCR4mRNA相对灰度值明显高于CD133阴性细胞(0.642 4±0.020 4比0.335 9±0.043 2,P=0.004);CD133阳性细胞中CXCR4蛋白表达相对灰度值明显高于CD133阴性细胞(0.765 0±0.106 6比0.409 4±0.019 5,P=0.013);CD133阳性细胞中CXCR4荧光蛋白表达明显强于CD133阴性细胞。③细胞侵袭能力:穿膜细胞数量在CD133阳性细胞中,与空白对照组(23.78±8.74)相比,SDF-1α组(62.89±15.27)明显增加(P=0.000 6),AMD3100组(10.33±2.00)明显减少(P=0.000 2);在CD133阴性细胞中,与空白对照组(6.59±3.09)相比,SDF-1α组(6.89±4.23)无明显变化(P=0.41),AMD3100组(6.11±2.67)亦无明显变化(P=0.38)。④细胞迁移能力:迁移细胞数量,在CD133阳性细胞中,与空白对照组(35.56±10.97)相比,SDF-1α组(74.56±15.80)明显增加(P=0.000 3),AMD3100组(12.67±2.40)明显减少(P=0.000 2);在CD133阴性细胞中,与空白对照组(9.56±1.74)相比,SDF-1α组(9.78±2.04)无明显变化(P=0.43),AMD3100组(9.54±1.74)亦无明显变化(P=0.42)。⑤在GBC-SD细胞中CD133 mRNA表达:与空白对照组(0.450 0±0.024 3)相比,SDF-1α组明显增加(0.626 5±0.048 7,P=0.004),AMD3100组(0.359 3±0.047 3)明显下降(P=0.011);CD133蛋白表达:与空白对照组(0.440 9±0.013 0)相比,SDF-1α组(0.508 9±0.020 7)明显增加(P=0.016),而AMD3100组(0.317 7±0.013 7)明显下降(P=0.004)。 结论 胆囊癌CD133阳性细胞高侵袭能力可能由于高表达CXCR4。

引用本文: 俞远林, 姜波健, 陆瑞褀, 王守练, 俞继卫. 胆囊癌CD133阳性细胞侵袭机制的实验研究. 中国普外基础与临床杂志, 2014, 21(2): 156-161. doi: 10.7507/1007-9424.20140036 复制

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